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dc.contributor.advisor Kim, Kyungjin -
dc.contributor.author Park, Inah -
dc.date.accessioned 2017-05-10T08:53:33Z -
dc.date.available 2017-01-18T00:00:00Z -
dc.date.issued 2017 -
dc.identifier.uri http://dgist.dcollection.net/jsp/common/DcLoOrgPer.jsp?sItemId=000002328669 en_US
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/20.500.11750/1496 -
dc.description.abstract Circadian clock controls an organism’s biological rhythm and regulates physiological conditions in response to external time cues. Most of living organisms have their own time-keeping mechanism that is maintained by transcriptional-translational autoregulatory feedback loops involving several clock genes such as Periods, Cryptochromes, Clock and Bmal1. Recent discoveries have found the relevance between changes in circadian oscillation and post-transcriptional modification by microRNAs (miRNAs). However, the specific mechanisms of miRNAs on circadian oscillation still remain unclear. This study demonstrated the regulatory effects of miR-24-3p and miR-25-3p on Period2 (Per2) expression by direct interaction with 3’ untranslated region (UTR) of Per2 using luciferase reporter assay. Furthermore, real-time bioluminescence analyses demonstrated that PER2 oscillation patterns were sensitive to intracellular concentration of miR-24-3p or miR-25-3p. Elevation of either miR-24-3p or miR-25p-3p resulted phase advancing and dampening, while down regulation of miR-24-3p and miR-25-3p caused phase delay and increase in relative amplitude of PER2 oscillation. In summary, miR-24-3p and miR-25-3p are involved in fine-tuning of circadian rhythmicity through regulating PER2 oscillation in conjunction with other post-translational modulators. ⓒ 2017 DGIST -
dc.description.tableofcontents 1. Introduction 7--
2. Materials and Methods 11--
3. Results 14--
3.1 Functional Validation of Candidate microRNAs Targeting 3’UTR of mouse Period2 mRNA 14--
3.2 Overexpression of miR-24-3p or miR-25-3p Downregulates PER2 Expression in Real-time Bioluminescence Analysis 15--
3.3 Inhibition of Endogenous miR-24-3p or miR-25-3p Upregulates PER2 Expression in Real-time Bioluminescence Analysis 16--
3.4 3’ Untranslated Region of Per2 mRNA is Essential for miR-24-3p and miR-25-3p for Modulating Circadian Oscillation 16--
4. Discussion 38--
5. References 42
-
dc.format.extent 40 -
dc.language eng -
dc.publisher DGIST -
dc.subject Circadian Rhythm -
dc.subject miR-24-3p -
dc.subject miR-25-3p -
dc.subject Period2 gene -
dc.subject Real-time Bioluminescence Analysis -
dc.subject 생체리듬 -
dc.subject Period2 -
dc.subject 실시간 인광 분석법 -
dc.title MicroRNAs as modulators of circadian gene Per2 oscillation -
dc.title.alternative miRNA 에 의한 생체시계 유전자 Per2 조절 -
dc.type Thesis -
dc.identifier.doi 10.22677/thesis.2328669 -
dc.description.alternativeAbstract 생체시계는 24 시간의 주기성을 가지며 외부 환경에 대한 정보에 민감하게 반응하여 생체 주기를 조절하며 생물의 항상성 조절에 중요한 역할을 한다. 생체리듬은 자가 전사-번역을 조절하는 기작으로 구성되어 있으며 여러 종류의 생체시계 유전자가 관여한다. 지난 수 십년 간의 생체리듬 연구에 따르면 생체시계 관련 유전자의 자가 되먹임 조절 고리에 의하여 한 개체가 24 시간의 생체 내 일주기성을 지니게 된다는 결과가 밝혀졌다. 더욱 흥미로운 것은 miRNA 역시 특정 mRNA 의 전사 후 조절을 통하여 생체리듬의 세밀한 조절 역할을 수행한다는 것이다. 본 연구에서는 실시간 인광 분석 장비와 Per2::Luc Knock-in 배아섬유아세포를 응용하여 miRNA 가 PER2::LUC 단백질의 일주기 발현 양상에 어떠한 영향을 미치는가에 대한 실험을 수행하였다. In silico 데이터 분석을 통하여miR-24-3p와 miR-25-3p를 선별하였고 이 miRNA들이 Per2 mRNA 의 3’-비번역 부위에 작용하는지 여부를 확인하기 위하여 유전자 조작을 가한 리포터 벡터를 사용하여 miRNA-mRNA 의 상호작용 확인하였다. 따라서 본 연구를 통하여 miR-24-3p 와 miR-25-3p 가 Per2 mRNA 의 3’-비번역부위에 작용하여 Per2 유전자의 발현이 조절됨을 밝혔다. ⓒ 2017 DGIST -
dc.description.degree Master -
dc.contributor.department Brain and Cognitive Sciences -
dc.contributor.coadvisor Choe, Young Shik -
dc.date.awarded 2017. 2 -
dc.publisher.location Daegu -
dc.description.database dCollection -
dc.date.accepted 2017-01-18 -
dc.contributor.alternativeDepartment 대학원 뇌인지과학전공 -
dc.contributor.affiliatedAuthor Park, In Ah -
dc.contributor.affiliatedAuthor Kim, Kyung Jin -
dc.contributor.affiliatedAuthor Youngshik Choe -
dc.contributor.alternativeName 박인아 -
dc.contributor.alternativeName 김경진 -
dc.contributor.alternativeName 최영식 -
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